La enfermedad celíaca (EC) es una enteropatía inmunomediada del intestino delgado desencadenada por la ingestión de gluten. Aunque el intestino delgado es el principal órgano afectado, también se han descrito alteraciones de las células sanguíneas periféricas.
En pacientes con EC tratados, es bien sabido que las células T CD4+ específicas de gluten son detectables en sangre 6 días después del inicio de una provocación con gluten (PCG) de 3 días. Estas células van acompañadas de una oleada de células T CD8+ y γδ+ activadas en el intestino, que son elementos clave en la patogénesis de la enfermedad. Las células T CD4+ específicas del gluten se consideran las principales impulsoras de la EC, ya que reconocen los péptidos del gluten unidos a los receptores HLA-DQ2/DQ8 e inician la cascada inmunológica que conduce a la atrofia vellositaria, mediada en gran medida por las células T CD8+ en el epitelio intestinal. El aumento de la subpoblación intraepitelial de células T γδ+ también es un rasgo distintivo de la EC, aunque su papel en la enfermedad aún no se conoce del todo. La detección de estas células T en sangre tiene importantes implicaciones para el diagnóstico de la EC, el desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos y la identificación de epítopos inmunodominantes del gluten, lo que subraya la importancia de una caracterización en profundidad de todas estas células [. Además, se ha observado que otros tipos celulares están alterados en la sangre de pacientes con EC, y que algunos cambios persisten incluso después de iniciar una dieta sin gluten (DSG).
En los últimos años, los avances en el campo de la citometría de flujo espectral han permitido el análisis simultáneo y en profundidad de diversos cambios celulares en múltiples tipos de células dentro de una única muestra. Los avances en citometría de flujo han ido acompañados del desarrollo de nuevos métodos analíticos que permiten la identificación de subpoblaciones celulares que requieren la consideración simultánea de múltiples marcadores. Los análisis automatizados y no supervisados mejoran significativamente la eficiencia y la capacidad de descubrir nuevas poblaciones celulares al reducir el tiempo de análisis, minimizar la subjetividad y el sesgo, y mejorar la reproducibilidad. Esto convierte a la citometría de flujo espectral en una potente herramienta para comprender las diferencias en la respuesta inmunitaria entre distintos grupos de individuos mediante el estudio de una amplia gama de marcadores.
Los investigadores de este estudio se propusieron identificar, mediante citometría de flujo espectral, las diferencias en los patrones celulares inmunológicos entre pacientes con EC y controles sanos (CS) que seguían una DSG y explorar los cambios en sus respuestas celulares el día 6 tras una reintroducción del gluten de 3 días. Por otro lado, también se intentó mejorar la caracterización de los linfocitos T CD4+, CD8+, y TCRγδ+ movilizados en la sangre periférica en respuesta a un CG de 3 días. Para ello, se recogieron muestras de sangre de 10 pacientes con EC y 8 controles sanos y en todas las muestras se analizaron mediante citometría de flujo espectral utilizando un panel de 34 marcadores.
Descubrieron que los pacientes con EC mostraban una menor proporción de células B de memoria en comparación con los controles sanos, tanto al inicio como después de la PCG. Además, se observaron los linfocitos T CD4+, CD8+ y TCRγδ+ activados en el intestino de los que se había informado anteriormente en el día 6 post-PCG, y descubrieron que la subpoblación CD8+ era la más fácilmente identificable mediante citometría de flujo. Es importante destacar que el marcador CCR9 demostró ser eficaz para mejorar la selección de estas células T sensibles al gluten, ofreciendo la posibilidad de aumentar la precisión del diagnóstico.
En conclusión, la citometría de flujo espectral proporciona una potente plataforma para la adquisición de datos multidimensionales extensos, aunque la gestión e interpretación de estos complejos conjuntos de datos sigue siendo un área que continúa evolucionando y mejorando. Para aprovechar todo el potencial de esta tecnología, es esencial emplear métodos analíticos no supervisados para reducir la complejidad de los datos y generar conocimientos preliminares, que posteriormente pueden validarse con enfoques analíticos establecidos. En este estudio, el uso de la citometría de flujo espectral permitió observar distintas variaciones en las poblaciones de linfocitos B y T, lo que proporcionó información valiosa sobre el panorama inmunitario de la EC. Se justifica una mayor investigación para explorar las implicaciones de estas observaciones para el manejo de la EC y las posibles estrategias de tratamiento.
